Wnt/β-catenin 訊號是幹細胞生物學中研究最深入的路徑，但其在不同幹細胞系統中的角色遠比「維持幹細胞性」更複雜。
Wnt 訊號的物種和組織特異性
- 腸道 ISC：Wnt 是不可或缺的維持訊號。Porcupine inhibitor（如 LGK974）阻斷 Wnt 分泌 → ISC 迅速消失 → 隱窩瓦解。
- HSC：爭議性最大。Reya et al.（2003, Nature）報告 Wnt 活化增強 HSC 自我更新；但 Luis et al.（2011, Cell Stem Cell）以 genetic model 發現適度 Wnt → HSC 維持、過度 Wnt → HSC 耗竭。「Goldilocks model」：Wnt 需在適當範圍內。
- 小鼠 ESC vs. 人類 ESC：CHIR99021（GSK3β inhibitor）在小鼠 ESC 中維持 naive pluripotency（2i 條件的一部分），但在人類 ESC 中驅動中胚層分化。
Wnt 梯度的建立機制
- 短程擴散模型：Wnt ligand 被脂質修飾（palmitoylation by Porcupine）使其疏水性高，限制了擴散範圍。Farin et al.（2016, Nature）以 FRAP 實驗在腸道隱窩中證明 Wnt 的擴散距離極短（~2 cell diameters）。
- R-spondin 作為遠程訊號：Yan et al.（2017, Nature）提出 R-spondin（而非 Wnt）才是腸道隱窩中建立幹細胞區域邊界的關鍵梯度分子。
Wnt 在癌症中的靶向策略
- Porcupine inhibitors（LGK974/WNT974, ETC-159）：阻斷 Wnt 分泌，對 RNF43/RSPO3-mutant 腫瘤有效。Phase I/II 進行中。
- β-catenin/TCF inhibitors：直接阻斷核內效應。PRI-724（CBP/β-catenin 交互作用抑制劑）在 Phase I。
- Anti-FZD antibodies：Vantictumab（anti-FZD1/2/5/7/8），Phase I 因骨密度下降而發展受限。
- Truncating APC mutations：大多數 CRC 的 Wnt 活化不在 ligand/receptor 層級 → 上游 Porcupine inhibitors 無效。需直接靶向 β-catenin 或下游效應子。
文獻：Clevers H & Nusse R (2012) Cell 149:1192-205 / Farin HF et al. (2016) Nature 530:340-3 / Yan KS et al. (2017) Nature 545:238-42 / Luis TC et al. (2011) Cell Stem Cell 9:345-56