脂質筏假說（Lipid Raft Hypothesis）自 Simons & Ikonen（1997, Nature）提出以來，一直是膜生物學中最具爭議的概念之一。2006 年 Keystone Symposium 的共識定義將脂質筏定義為「富含固醇和鞘脂質的小型（10-200 nm）、異質性、高度動態的膜微區，可被特定蛋白-蛋白質或蛋白-脂質交互作用穩定為更大的平台」。
相分離的物理化學基礎
脂質筏的理論基礎來自脂質雙層的相行為。三元混合物（飽和磷脂/不飽和磷脂/膽固醇）的相圖在特定組成範圍內表現出 Lo/Ld 共存（Veatch & Keller, 2005, Biochimica et Biophysica Acta）。在巨型單層囊泡（GUV）和巨型質膜囊泡（GPMV）中，可直接觀察到微米級的相分離結構域。然而，活細胞質膜在生理溫度下的混合臨界點（miscibility critical point）可能非常接近，使得大尺度相分離被臨界波動（critical fluctuations）所抑制，只存在奈米級的成分波動——這就是為什麼在活細胞中難以觀察到穩定的大筏結構域。
Honigmann et al.（2014, eLife）使用 STED 超解析度顯微術在活細胞膜上觀察到 ~80 nm 的膽固醇依賴性微區，但其是否對應經典的脂質筏定義仍有解釋空間。Sezgin et al.（2017, Nature Reviews Molecular Cell Biology）的全面綜述指出，脂質筏可能更適合被理解為一種「組織原則」（organizing principle）而非離散的物理實體。
蛋白質對筏的影響：主動組織 vs. 被動分配
經典觀點認為蛋白質被動分配到預先存在的脂質微區。但 Bhojnagar et al.（2004）提出，蛋白質的聚集本身可能驅動局部脂質重組——即蛋白質主動創造筏而非被動加入。Kusumi 的骨架柵欄模型進一步指出，肌動蛋白皮層骨架通過穿膜蛋白的 picket 效應限制膜組分的長程擴散，為筏的局部穩定提供了非脂質的物理機制。
Caveolae 作為穩定化的脂質筏
Caveolae 由 caveolin-1（或肌肉中的 caveolin-3）和 cavin（PTRF）蛋白穩定，形成 Ω 形的膜內凹（50-80 nm）。Cryo-EM 結構（Stoeber et al., 2016, Cell）揭示 caveolin 寡聚體的八聚體盤狀結構。Caveolae 的功能包括：(1) 機械壓力緩衝——膜張力增加時 caveolae 攤平釋放額外膜面積（Sinha et al., 2011, Cell）；(2) 脂質代謝調節；(3) 特化的內吞路徑（caveolae-mediated endocytosis，如 SV40 病毒進入）。
實驗方法學的演進
DRM（detergent-resistant membrane）分離法——用 1% Triton X-100 在 4°C 處理後取蔗糖密度梯度上浮的不溶組分——曾是研究脂質筏的標準方法，但現已被廣泛認為有嚴重的偽陽性問題（去污劑本身可能誘導相分離）。現代方法包括：(1) 超解析度顯微術（STED, PALM/STORM）；(2) 單分子追蹤（SPT）配合分析膜蛋白的擴散行為；(3) 脂質組學（lipidomics）的微區特異性採樣；(4) 計算模擬——粗粒化分子動力學（CG-MD）如 Martini 力場可模擬含百萬脂質分子的膜系統，預測脂質的偏好性聚集（Marrink et al., 2007, Journal of Physical Chemistry B）。
疾病關聯
HIV 病毒出芽優先發生在脂質筏微區——Gag 蛋白的肉豆蔻酸修飾引導其定位到富含膽固醇的膜區域。Methyl-β-cyclodextrin 去除膽固醇可抑制 HIV 出芽，但也影響膜的整體功能，缺乏臨床特異性。Alzheimer 病中，γ-secretase 對 APP 的切割在脂質筏中進行，膽固醇水平影響 Aβ 的產生——這是 statin 類藥物可能對 AD 有保護作用的分子假說之一，但臨床證據不一致。近年 COVID-19 研究也揭示 SARS-CoV-2 的 spike 蛋白結合 ACE2 受體後的內吞事件偏好在脂質筏微區進行，Methyl-β-cyclodextrin 去除膽固醇可減少病毒進入。